MECANISMOS DE SILENCIAMIENTO GÉNICO DURANTE EL DESARROLLO DEL GAMETOFITO FEMENINO EN Arabidopsis thaliana (MECHANISMS OF GENE SILENCING DURING THE DEVELOPMENT OF THE FEMALE GAMETOPHYTE IN Arabidopsis thaliana)

Resumen

Resumen

Silenciar un gen significa disminuir la expresión del mismo y a partir de los efectos, afectar su función, actuando a diferentes niveles, por ejemplo, silenciamiento transcripcional (TGS), silenciamiento post-transcripcional (PTGS) y traduccional. Los cuales, presentan elementos comunes mediados por ARNs pequeños (RNAp), que proporcionan especificidad y se acomplejan con proteínas efectoras del silenciamiento génico. Recientemente se reportó la participación de ARNs pequeños  en la determinación de la identidad de la célula madre de la megaspora. En este trabajo se plantea una estrategia para estudiar las rutas de silenciamiento que participan en la regulación de la identidad celular durante el desarrollo del gametofito femenino. Para lo anterior se generaron líneas silenciadoras del gen GUS (GUSRNAi). Posteriormente se seleccionaron algunas de estas líneas para ser cruzadas con los marcadores del desarrollo del gemetofito femenino. Se obtuvieron imágenes que reflejaron la actividad de las líneas marcadoras durante el desarrollo reproductivo. En las plantas de la línea GUSRNAi;Marcadora se observó una expresión atenuada o nula del marcador de identidad. Lo anterior demostró la capacidad de la lineas para llevar a cabo silenciamiento génico en células del gametofino femenino.

Palabras clave: Gametogénesis, linaje celular, ARNs.

Abstrac

Silencing a gene means decreasing its expression affecting its function, acting at different levels, for example transcriptional silencing (TGS), post-transcriptional silencing (PTGS) and translational silencing. They present common elements mediated by small RNAs (RNAs), which provide specificity and form complexes with gene silencing effector proteins. The participation of small RNAs in the determination of the identity of the megaspore mother cell was recently reported. In this work, a strategy is proposed to study the gene silencing pathways involved in the regulation of cell identity during the development of the female gametophyte. For this, we generated silencing lines of the GUS gene (GUSRNAi). Subsequently, some of these lines were selected to be crossed with the developmental marker of the female gametophyte, ET2209. Images that reflected the activity of the marker lines during reproductive development were obtained. While in plants GUSRNAi;ET2209 we observed an attenuated or null expression of the identity cell marker. The above demonstrated the ability of these lines to carry out gene silencing in female gametophyte cells.

Keywords: Gametogenesis, cell lineage, RNAs.